细胞焦亡（Pyroptosis）是一种由炎症信号引发的程序性细胞死亡，具有细胞膜穿孔以及细胞肿胀破裂的明显特点。这一过程依赖于炎性半胱天冬酶（如caspase-1、4、5、11），并伴随大量促炎因子的释放，例如IL-1β和IL-18。细胞焦亡在形态学特征、发生机制和调控方式上与凋亡及坏死等其他细胞死亡形式显著不同。

为了检测细胞焦亡，EVO视讯推出了BBcellProbe®细胞焦亡检测试剂盒。该试剂盒运用比色光度法，监测与细胞焦亡相关的蛋白酶Caspase的活性以及细胞质膜的完整性。试剂盒的核心原理是基于caspase-1/4/5催化其底物产生黄色的pNA，pNA在405 nm波长处有强烈的光吸收，因此可以通过测定其吸光度来分析细胞焦亡相关蛋白酶的活性。此外，试剂盒还包含非通透性荧光探针，用以检测细胞膜的完整性，具有良好的实验适应性。

使用EVO视讯所提供的BBcellProbe®试剂盒进行细胞焦亡检测，可通过酶标仪、荧光酶标仪、分光光度计、荧光光度计，甚至激光共聚焦显微镜及流式细胞仪进行检测。对于细胞样本类型，主要针对培养细胞进行实验。具体步骤包括：

一、 准备裂解缓冲液和检测缓冲液;

二、 样品处理：

• 1. 收集细胞并离心2-3分钟，轻轻吸取培养基，尽可能将细胞沉积;
• 2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次尽量吸干上清;
• 3. 向细胞中加入50 μl冷裂解缓冲液，并高速涡旋振荡15秒;
• 4. 将细胞置于冰上持续振荡25-40分钟;
• 5. 在4℃下以10000×g离心10分钟;
• 6. 将上清液转移至另一预冷的离心管中，保存于冰上或-80℃冰箱中备用。

三、 对处理后的上清进行蛋白定量;

四、 开展焦亡检测。

EVO视讯的BBcellProbe®细胞焦亡检测试剂盒不仅可以提供高灵敏度的检测，还可以选择其他荧光标记的检测试剂盒（如AFC、R110、AMC），满足不同检测需求。为了确保最佳的实验效果，建议在可行的情况下选择荧光检测方法。对于没有荧光检测条件的用户，EVO视讯的比色法细胞焦亡检测试剂盒同样是一个有效的选择，需确保所检测样品的细胞焦亡程度足够高。