### 检测原理

EVO视讯的2DLuminescent Cell Viability Assay采用ATP依赖的荧光素酶催化反应，通过化学发光信号测定细胞内ATP含量，从而实现对细胞活力的检测或活细胞数量的定量分析。该方法具有广泛的检测线性范围、高灵敏度和良好的稳定性。在96孔板中，100到100,000个细胞的检测存在良好的线性关系，但不同细胞样本的数量上限可能有所不同。此外，操作简便，试剂盒中的检测试剂为即用型，读数稳定，检测速度快，整个过程大约仅需10分钟，无需清洗细胞或更换培养液。与其他常用的细胞活力测定方法如Calcein-AT和CCK-8相比，EVO视讯的2DLuminescent Cell Viability Assay更为便捷。

### 产品优势

EVO视讯的2DLuminescent Cell Viability Assay（货号：abs50065）具备高检测灵敏度和宽线性范围，适用于少量样本的检测及大量样本的高通量筛选。其优势主要包括：

• 方便快速：试剂盒中的检测试剂即用，稳定性高，检测过程快速，仅需约10分钟。
• 灵敏度高：能够检测最低10nmol的ATP。
• 线性范围广：在96孔板中，从100到100,000个细胞之间表现出良好的线性关系。
• 高通量：兼容少量样本与较大样本量的高通量筛选。

### 使用方法

#### 一、试剂准备

1. **试剂融化**：实验前一天将试剂从冰箱取出，放在4℃下过夜融化，也可在实验当天室温融化或在22℃水浴中融化，但水温不应超过25℃。

2. **平衡至室温**：确保试剂在使用前达到室温，若需在<23℃水浴中平衡，时间控制在30分钟以内。

3. **混匀**：轻轻颠倒5次以混合均匀。

4. **添加Triton X-100**：根据实验需要，加入适量的Triton X-100，使其终浓度达到0.2%。

#### 二、检测步骤

1. **细胞培养**：使用适合化学发光检测的96孔板，每孔接种100μL的细胞（初始接种细胞密度应根据培养时间确定，每孔细胞数量不宜超过10万个），并设置不含细胞的培养液孔作为阴性对照。

2. **（可选）制作ATP标准曲线**：将ATP标准溶液用PBS稀释，按适当浓度梯度加入96孔板。

3. **细胞活力检测**：

• 融解并平衡检测试剂。
• 将细胞培养板平衡10分钟。
• 向每孔加入100μL的检测试剂。
• 室温振荡2分钟以促进细胞裂解。
• 静置10分钟以稳定发光信号。
• 使用多功能酶标仪进行测定，根据需要调整检测时间。
• 根据化学发光读数或ATP标准曲线计算细胞的相对活力。

### 注意事项

1. **温度管理**：避免试剂多次冻融，推荐-20℃避光保存。使用前需平衡至室温。

2. **化学环境影响**：荧光素酶的活性可能受到培养基、血清或药物的影响。在制定实验设计时，需考虑设置对照孔以排除干扰。

3. **光敏感性**：储存时要注意避光，以防发光强度加速衰减。

4. **防止ATP污染**：进行实验时佩戴口罩和手套，避免与可能污染的表面接触。

如有细胞实验相关问题，欢迎与我们交流探讨！更多产品信息，请访问EVO视讯官网。

### 推荐产品

• 货号：abs50065 2DLuminescent Cell Viability Assay 50mL×2
• 货号：abs50059 2D/3D/Organoid ATP Viability Assay Kit 100mL
• 货号：abs9149 Triton X-100 500mL
• 货号：abs7149 超低吸附培养板（96孔，黑框透明底透明盖）1箱
• 货号：abs7151 超低吸附培养板（96孔，白框透明底透明盖）1箱
• 货号：abs7053 10mL 一次性移液管 1箱
• 货号：abs7054 25mL 一次性移液管 1箱

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